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技術(shù)文章

生物實驗室安全以及防護措施

2021-02-10 10:57:46

  2003年春季爆發(fā)流行的傳染性非典型肺炎給實驗室工作人員敲響了警鐘,實驗室生物安全防護問題日益得到人們重視。

  我國《實驗室生物安全通用要求》國家標(biāo)準(zhǔn)已正式發(fā)布,并于2004年10月1日正式實施。該標(biāo)準(zhǔn)就實驗室生物安全管理和實驗室的建設(shè)原則作了規(guī)定,同時還規(guī)定了生物安全分級、實驗室設(shè)施設(shè)備的配置、個人防護和實驗室安全行為等方面內(nèi)容。該標(biāo)準(zhǔn)解決了實驗室安全管理存在的隱患,將有效防止類似生物安全事故的再次發(fā)生。

  一、 實驗室生物安全分級

  《實驗室生物安全通用要求》國家標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)所操作的生物因子的危害程度和采取的防護措施,將生物安全實驗室的生物安全防護水平分為4級,Ⅰ級防護水平最低,Ⅳ級防護水平最高,確定了不同等級水平實驗室的建立和評價標(biāo)準(zhǔn)。

  一級生物安全實驗室(BSL-1)為實驗室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對健康成年人已知無致病作用的微生物,如用于教學(xué)普通微生物實驗室等,具有Ⅰ級防護水平。

  二級生物安全實驗室(BSL-2)為實驗室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物,具有Ⅱ級防護水平。

  三級生物安全實驗室(BSL-3)為實驗室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸系統(tǒng)途徑使人傳染上嚴重甚至致死疾病的致病微生物及其毒素,具有Ⅲ級防護水平。

  四級生物安全實驗室(BSL-4)為實驗室結(jié)構(gòu)設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人體具有高度的危險性,通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素,具有Ⅳ級防護水平。

  根據(jù)以上定義,目前市、區(qū)兩級疾病預(yù)防控制機構(gòu)實驗室因接觸可能含有致病微生物的標(biāo)本,通常應(yīng)達到二級生物安全實驗室(BSL-2)要求,BSL-2適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物,其與BSL-1的區(qū)別在于:(1)實驗人員是否接受過生物安全防護的培訓(xùn);(2)是否有進入生物安全實驗室的限制措施;(3)對已經(jīng)受到或可能受到污染銳器的使用是否足夠重視;(4)某些可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠或飛濺物的實驗過程,是否在生物安全柜中或其它物理抑制設(shè)備中進行。

  二、 實驗室設(shè)施設(shè)備的配置

  生物安全實驗室防護水平不同,相應(yīng)的實驗室設(shè)施設(shè)備的配置也不盡相同。

  1、和BSL-1相關(guān)的病源,其操作一般不需要生物安全柜之類的特殊遏制裝置或設(shè)備;實驗臺表面應(yīng)能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿和耐用于工作臺面及設(shè)施消毒的其他化學(xué)物質(zhì);應(yīng)裝防止蒼蠅的窗紗。

  2、BSL-2適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物,實驗室設(shè)施設(shè)備的配置及操作應(yīng)遵循以下準(zhǔn)則:

  (1)任何時候都要使用正確保養(yǎng)的生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設(shè)施、或物理遏制裝置。

  確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器(容器內(nèi)部的壓力可能與大氣壓不一致)、動物鼻孔接種、從動物或胚胎卵采集感染組織。

  涉及高濃度或大體積的傳染源時,若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機,若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實驗室內(nèi)離心。

  (2)當(dāng)必須在生物安全柜外處理微生物時,需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。

  (3)在實驗室內(nèi),必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實驗室區(qū)域時,防護服必須留在實驗室內(nèi)。防護服可以在實驗室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。

  (4)可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時,要戴手套。戴兩副手套更合適。明顯污染的手套要處理,當(dāng)有關(guān)傳染源工作結(jié)束時或手套損傷時,要去掉手套。一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用,不能用于接觸“潔凈”的表面(鍵盤、電話等),也不應(yīng)當(dāng)戴著到實驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后,要洗手。

  (5)實驗臺表面應(yīng)能防水、耐熱、耐有機溶劑、耐酸堿和耐用于工作臺面及設(shè)施消毒的其他化學(xué)物質(zhì);應(yīng)有眼睛沖洗裝置;如果實驗室有對著外面的窗子,應(yīng)裝防止蒼蠅的窗紗。

  (6)安裝生物安全柜時,要考慮到房間的通風(fēng)和排風(fēng),不會導(dǎo)致生物安全柜超出正常參數(shù)運行。生物安全柜應(yīng)遠離門、遠離能打開的窗,遠離行走區(qū),遠離其他可能引起風(fēng)壓混亂的設(shè)備,保證生物安全柜氣流參數(shù)在有效范圍內(nèi)。

  需要提醒大家注意的是,對于新建實驗室在設(shè)計與建造方面一定要滿足實驗室安全方面的要求;對于已經(jīng)建成的實驗室,即使格局無法改變,也應(yīng)努力將工作區(qū)與休息區(qū)分離,并盡可能滿足生物安全實驗室的其它要求。

  三、 個人防護和實驗室安全行為

  我們在參加突發(fā)事件應(yīng)急處理的同時,一定要保障的疾控人員的自身安全,防止出現(xiàn)實驗室感染和泄露。

  1、一級生物安全實驗室(BSL-1)

  (1) 穿實驗服、大褂、制服,避免污染和衣服上的塵土。

  (2) 若手上皮膚有傷或出皮疹,應(yīng)戴手套。

  (3) 操作過程中,估計會出現(xiàn)微生物或危險物濺出時,應(yīng)戴保護眼具。

  2、二級生物安全實驗室(BSL-2)

  (1) 在開展有關(guān)傳染病源工作時,實驗室主任應(yīng)禁止或限制人員進入實驗室。一般情況下,易感人員或感染后會出現(xiàn)嚴重后果的人員,不允許進入實驗室,例如,患有免疫缺陷或免疫抑制的人,其被感染的危險性增加。實驗室主任對每種情況的估計和決定誰能進入實驗室工作,負有最終責(zé)任。

  (2) 實驗室人員接受適當(dāng)?shù)?、和實驗室中處理或?qū)⒁幚淼牟≡从嘘P(guān)的免疫接種或測試(如,乙肝免疫接種或TB皮試);根據(jù)所處理的病源,適當(dāng)時,收集和儲存適合于實驗室人員和有風(fēng)險人員使用的基本血清樣品。根據(jù)所處理病源或設(shè)施的功能,應(yīng)定期收集其他血清樣品。

  (3) 實驗室主任為實驗室人員特別制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序或生物安全手冊中,應(yīng)包括生物安全程序。對于有特殊風(fēng)險的人員,要求閱讀并在工作及程序上遵照執(zhí)行。

  (4) 實驗室主任保證實驗及其輔助人員接受適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn),包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險、防止暴露的必要措施和暴露評估程序。當(dāng)程序必需改變時,有關(guān)人員必須每年更新知識,接受附加培訓(xùn)。

  (5) 存在外源性病源時,實驗室入口處應(yīng)貼有生物危險標(biāo)志,并顯示以下信息:有關(guān)病源、生物安全級別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話號碼、在實驗室中必須佩帶的個人防護設(shè)施、出實驗室所要求的程序

  (6) 不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。不允許在工作區(qū)存放食物和日常生活用品。在實驗室中,戴隱型眼鏡的人,也需戴口罩或面罩。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。

  (7) 不能用嘴移液,只能用機械裝置移液;制定銳器安全使用規(guī)范。對于污染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器、毛細管、手術(shù)刀;可以用其他器具的,就不要用銳器??赡軙r,用塑料器具代替玻璃器具。打碎的玻璃器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在到掉前,應(yīng)按照規(guī)定進行消毒。

  (8) 所有的操作過程應(yīng)盡量細心,避免產(chǎn)生濺出和氣溶膠;消毒至少一天一次,活體濺出時,也應(yīng)及時進行臺面消毒。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時,要立即向?qū)嶒炇抑魅螆蟾妗_M行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察、治療,保留書面記錄。

  (9) 所有的培養(yǎng)物、儲存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進行消毒,如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近實驗室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運出實驗室,其包裝應(yīng)符合國家有關(guān)規(guī)定。

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